技術文章 / article
組織蛋白酶K試劑盒在骨質疏松發揮的作用
2015-03-12 瀏覽次數：1865
一.組織蛋白酶K試劑盒簡介：
定量測定人血清或細胞培養上清液中由破骨細胞分泌出的組織蛋白酶K。組織蛋白酶K降解骨膠原基質，是zui豐富的活化和吸收破骨細胞的合成蛋白，也是吸收活性的特異性標志物。蛋白酶K在組織溶解、重建和骨膠原降解中具有重要作用。組織蛋白酶K在不同物種間的高同源性(小鼠86%，大鼠88%，豬97%，兔96%)，因此試劑盒也能用于動物模型的研究。
二.組織蛋白酶K試劑盒臨床應用：
- 骨轉換研究
- 惡性骨疾病
- 應用于腫瘤學
- 監測骨吸收藥物的療效
- 預防糖皮質激素誘導的骨質疏松
- 預防原發性和繼發性骨質疏松
- 監測作用于骨骼多個區域的炎癥疾病
- 監控治療如激素替代治療，雙膦酸鹽治療
- 監測風濕性骨關節炎和骨關節炎的治療療效
- 蛋白酶k與骨關節炎軟骨退變關系密切，特別在早期發病中有重要作用
三.組織蛋白酶K試劑盒樣本制備：
1. 病人在平臥安靜狀態下進行靜脈取血。采血量一般為2-3 ml。
2. 分析標本可以是血清，或是細胞培養清液。
3. 室溫下，90分鐘內離心分離并分析標本。建議的離心分離條件是：4°C下2000轉離心15分鐘。
4. 在4°C標本可以保存2天。
5. 若長時間保存標本，可在-20°C 下或在-70°C的條件下存放。zui多進行4次解凍。
血脂標本或溶血標本會引起結果錯誤，因此，分析之前必須充分混合標本。
四.組織蛋白酶K試劑盒操作步驟：
1 沖洗緩沖液（WASHBUF）：
1. 稀釋濃縮洗液，稀釋比例為1：20，即 50 ml 洗液中加入 950 ml 蒸餾水。
2. 濃縮液中的晶體可在室溫下溶解。
3. 沖洗緩沖液在2°C - 8°C條件下穩定，4. 在標5. 注的有效期限內都可使用。
6. 分析時只能使用稀釋后的洗液緩沖液。
3 標準液（STD）：
1. 在每個瓶中加入1ml的ASYBUF分析緩沖液；
2. 在室溫下（18-26°C）放置20分鐘；
3. 在VORTEX MIXER上充分混勻；
4. 標準液若要分幾次使用，建議分裝保存，避免冷凍－解凍過程；5. 配制好的標準液在-20°C下穩定，可在有效期內使用；
6. 一定不要將標準液在室溫下放置
4 質控液（CTRL）：
5 在每個瓶中加入1ml的ASYBUF分析緩沖液；
6 在室溫下（18-26°C）放置20分鐘；
7 在VORTEX MIXER上充分混勻；
8 質控液若要分幾次使用，建議分裝保存，避免冷凍－解凍過程；
9 配制好的質控液在-20°C下穩定，可在有效期內使用；
10 一定不要將質控液在室溫下放置。
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